單核細(xì)胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是人畜共患的食源性致病菌,其可以穿透多個宿主屏障,而內(nèi)化素蛋白家族被認(rèn)為是LM穿透宿主屏障過程中起重要作用的毒力因子。本研究利用同源重組的方法構(gòu)建了LM野生菌株EGDe的inlA和inlB基因雙缺失菌株,利用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測其主要毒力基因表達(dá)的變化,并以HT29結(jié)腸癌細(xì)胞為對象,研究inlA和inlB基因缺失對LM侵襲宿主細(xì)胞能力的影響。結(jié)果表明基因的缺失對其生長能力沒有影響,但多個毒力基因的表達(dá)發(fā)生了不同程度的變化,同時發(fā)現(xiàn)inlA和inlB基因的缺失使LM侵襲HT29結(jié)腸癌細(xì)胞的能力顯著下降(P<0.05)。本研究成功構(gòu)建LM的inlA和inlB基因雙缺失菌株,并初步研究了基因缺失對LM侵襲宿主細(xì)胞能力的影響,為深入研究內(nèi)化素InlA和InlB在LM入侵宿主細(xì)胞過程中的具體作用提供了支持。
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