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雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附快速檢測冷鮮肉中的6 種血清型沙門氏菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 166 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 張帥,齊穎穎,張紅星,王怡雯,謝遠紅,劉 慧
關(guān)鍵詞: 沙門氏菌;雜交瘤技術(shù);單克隆抗體;雙抗夾心ELISA
摘要:

為快速檢測冷鮮肉中的沙門氏菌,篩選出1 株產(chǎn)抗6 種沙門氏菌單克隆抗體的細胞株,運用產(chǎn)生的抗體建立酶聯(lián)免疫吸附檢測方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。實驗采用6 種血清型致病沙門氏菌制備出混合抗原,對BALB/c小鼠及新西蘭大白兔進行免疫,運用雜交瘤技術(shù)進行細胞融合,制備出抗沙門氏菌單克隆抗體以及多克隆抗體,并建立雙抗夾心ELISA體系檢測冷鮮肉中沙門氏菌。結(jié)果表明,成功篩選出1 株能穩(wěn)定分泌抗沙門氏菌的單克隆抗體雜交瘤細胞株6E7,保藏編號為CGMCC 10313以及多克隆抗體,效價分別為1∶1.28×106和1∶8.0×105 ;將多抗作為包被抗體吸附于96 孔酶標板上,并用辣根過氧化物酶標記單抗,建立雙抗夾心ELISA體系;檢測模擬污染肉樣中沙門氏菌,其檢測限為800 CFU/g;并與其他血清型沙門氏菌、志賀氏菌、阪崎腸桿菌、大腸桿菌O157:H7、金黃色葡萄球菌及單增李斯特菌均無交叉反應(yīng),特異性良好。

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