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大米鎘結(jié)合蛋白的分離純化及純度鑒定
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 159 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陳 露,陳季旺,蔡 俊,丁文平,吳永寧
關(guān)鍵詞: 大米鎘結(jié)合蛋白;分離純化;離子交換色譜;分子質(zhì)量
摘要:

采用石墨爐原子吸收光譜法(graphite furnace atomic absorption spectrometry,GFAAS)測(cè)定不同品種、不同加工精度大米及大米4 種蛋白質(zhì)中的鎘含量。選用鎘含量較高的大米為實(shí)驗(yàn)原料,采用Osborne分級(jí)法提取大米中的4 種蛋白質(zhì)(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白),以及超濾、離子交換色譜從鎘含量較高的大米蛋白中分離純化出均一純度的大米鎘結(jié)合蛋白(rice Cd-binding protein,RCBP),十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鑒定RCBP的純度及測(cè)定分子質(zhì)量。結(jié)果表明:秈米中鎘含量高于糯米及粳米;隨著加工精度的增加,同種大米中的鎘含量依次降低。4 種大米蛋白中的鎘含量分別為0.66、0.31、0.63、0.23 μg/g,清蛋白中鎘含量最高。超濾分離大米清蛋白(rice albumin,RA)得到大米超濾清蛋白(rice ultrafiltration albumin,RUA),離子交換色譜純化RUA得到目標(biāo)鎘結(jié)合蛋白(組分c),SDS-PAGE鑒定組分c為單一條帶,分子質(zhì)量為14 kD。

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