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韭菜β-木糖苷酶的分離純化與部分性質(zhì)研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 140 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 萬 驥,王 丹,傅 婷,李蕊伽,廖海君,唐云明
關(guān)鍵詞: 韭菜;β-木糖苷酶;分離純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

新鮮韭菜經(jīng)勻漿、緩沖液提取、硫酸銨分級(jí)沉淀、羧甲基離子交換層析(carboxymethyl-sepharose,CMSepharose)再通過Superdex-200凝膠過濾層析,從而獲得電泳純的β-木糖苷酶。該酶的比活力達(dá)到18.25 U/mg,純化倍數(shù)為12.59,回收率為1.83%,分子質(zhì)量為123.02 kD,亞基分子質(zhì)量為61.51 kD。通過對(duì)β-木糖苷酶的酶學(xué)性質(zhì)研究得到最適溫度為65 ℃,最適pH值為4。該酶在25~55 ℃及pH 3.0~5.0的范圍內(nèi)有較好的穩(wěn)定性;在最適條件下測得其米氏常數(shù)(Km)值為0.28 mmol/L;甲醇、乙醇、異丙醇及十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS)和Ag+對(duì)該酶具有抑制作用,Mn2+和Co2+對(duì)該酶具有一定的激活作用。

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