為獲得植物乳桿菌G63高效的電轉化方法,本研究從細胞生長狀態(tài)、細胞弱化劑質量濃度、洗滌液、質粒添加量和電擊參數(shù)等方面對菌株G63的電轉化效率進行優(yōu)化。結果表明:取菌株G63對數(shù)生長中期的細胞制備感受態(tài),以1 g/100 mL甘氨酸作為細胞弱化劑,分別用1 mmol/L MgCl2和30 g/100 mL聚乙二醇1000洗滌細胞,并用30 g/100 mL聚乙二醇1000作為電擊液,加入20 μg穿梭質粒,在1.5 kV和400 ω條件下進行電擊,可以獲得最高的電轉化效率,轉化效率達到1.18×103 CFU/μg DNA,滿足后續(xù)遺傳學實驗要求。
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