以高效制備二肽基肽酶 IV(dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV)為目的,以牛腎為原料,經(jīng)酸沉淀、硫酸銨鹽析和凝膠過濾層析獲得高純度DPP-IV。還原條件下,純化蛋白的分子質(zhì)量為106 kDa,純化倍數(shù)為169.9,得率為9.5%。對(duì)該蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定得到12 個(gè)肽段,共517 個(gè)氨基酸殘基,與牛DPP-IV氨基酸序列的匹配度為100%。對(duì)其性質(zhì)研究發(fā)現(xiàn),DPP-IV為糖蛋白且以二聚體形式(210 kDa)存在,等電點(diǎn)為5.8。DPP-IV的二級(jí)結(jié)構(gòu)具有典型的β-折疊構(gòu)象,熱變性溫度為(72.7±0.3)℃。金屬離子Zn2+、Fe2+及Fe3+對(duì)DPP-IV活力有明顯的抑制作用,1 mmol/L的Zn2+對(duì)DPP-IV力抑制率高達(dá)98%。
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