以亞臨界水降解高溫芝麻餅粕蛋白水解液為研究對象,通過納濾、超濾及液相層析系統(tǒng)對水解液中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotension converting enzyme,ACE)抑制肽進(jìn)行分離純化,并通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,合成相應(yīng)寡肽驗(yàn)證ACE抑制活性。預(yù)測寡肽的吸收代謝特性,建立三維定量構(gòu)效關(guān)系(three dimensional quantitative structure-activity relationship,3D-QSAR)模型,并進(jìn)行分子對接分析。結(jié)果顯示:分子質(zhì)量<3 kDa組分具有最強(qiáng)的ACE抑制作用,進(jìn)一步純化后從峰1組分中共鑒定到9 個ACE抑制肽,這些肽不會干涉人體正常的生理活動。基于比較分子場分析法成功建立LFRAF的3D-QSAR模型。ACE抑制肽的C端處帶正電荷氨基酸殘基與側(cè)鏈處引入大基團(tuán)能夠提高ACE抑制能力。LFRAF通過占據(jù)ACE的S2、S1′活性口袋,并與Zn2+結(jié)合從而抑制ACE活性。該結(jié)果表明采用亞臨界水技術(shù)降解高溫芝麻粕中蛋白制備ACE抑制肽可行。
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