利用串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)簽定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),分析單獨(dú)熱脅迫組和熱-鹽共脅迫組之間的蛋白質(zhì)組差異,篩選與耐熱性提高相關(guān)的關(guān)鍵蛋白。結(jié)果發(fā)現(xiàn),熱休克蛋白12以及麥角固醇生物合成蛋白(ergosterol biosynthetic protein,ERG)28、ERG25等麥角固醇合成相關(guān)酶的表達(dá)在鹽脅迫后顯著增加,有利于維持熱脅迫下細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定。鹽脅迫顯著提高谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶Y-2基因的表達(dá),對(duì)抑制熱誘導(dǎo)的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)氧化損傷有重要作用。同時(shí),鹽脅迫顯著提高熱脅迫下碳水化合物代謝和能量代謝通路中多種酶(己糖激酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、磷酸甘油酸變位酶1、磷酸甘油酸變位酶2、磷酸甘油酸激酶、乙醇脫氫酶、細(xì)胞色素c氧化酶亞基6A、V型質(zhì)子ATP酶亞基c’)的表達(dá),有利于細(xì)胞內(nèi)ATP合成和酵母菌耐熱性的提高。本研究結(jié)果為耐熱酵母菌的基因工程改造以及其高溫乙醇發(fā)酵能力的改善提供重要技術(shù)支撐。
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