蛋白質(zhì)糖基化修飾位點(diǎn)的定位分析在糖基化蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域至關(guān)重要,本實(shí)驗(yàn)建立CID中性丟失引發(fā)的多級質(zhì)譜對多肽糖基化位點(diǎn)分析的方法。以糖基化多肽為研究對象,采用ESI CID MS對Amadori糖基化多肽進(jìn)行CID多級激發(fā)裂解,MS3裂解分別可以由3H2O、3H2O+HCHO的中性丟失引發(fā),根據(jù)糖基化肽段的分析鑒定,均可完成對糖基化修飾位點(diǎn)的定位分析,但是在多級質(zhì)譜分析中,3H2O中性丟失引發(fā)的糖基化肽段的鑒定更加精確,且在干熱條件下,卵清蛋白中的K227相對K229更易發(fā)生糖基化修飾。綜上分析,通過CID MS3多步激發(fā)質(zhì)譜技術(shù)可以對一糖多肽進(jìn)行糖基化定位分析。
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