為研究褐藻糖膠中具有抗凝血活性的寡糖組分,從羊棲菜中分離純化得到褐藻糖膠(命名為SFF),通過高效液相色譜法、高效凝膠滲透色譜法、化學法測定SFF的單糖組成、分子質量、理化性質。采用鹽酸降解法降解SFF,并通過Bio-gel P4凝膠色譜柱對寡糖組分進行有效分離。采用活化部分凝血酶時間、凝血酶時間、凝血酶原時間評價寡糖組分的抗凝血活性,篩選高活性且低分子質量的寡糖組分,通過質譜法解析其結構,探究抗凝血SFF寡糖的結構特征。結果表明,SFF主要由巖藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖組成,物質的量比為67.11∶26.69∶2.54∶3.66。SFF分子質量較大為708 kDa,總糖、蛋白、硫酸基質量分數(shù)分別為56.44%、1.14%和26.22%。鹽酸降解產(chǎn)物經(jīng)凝膠色譜柱分離得到5 種寡糖組分P1~P5,這5 種寡糖組分均可延長活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT),其中P1、P2、P3對APTT的延長作用高于P4、P5,P3的延長作用尤為明顯;對凝血酶時間和凝血酶原時間無延長作用。高抗凝血、低分子質量寡糖組分P3的質譜分析表明,P3是一種高純度寡糖組分,主要由二硫酸化巖藻三糖組成。本實驗篩選出一種具有良好抗凝血活性的高純度寡糖組分,豐富了抗凝血褐藻糖膠寡糖的研究。
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