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諾氟沙星免疫學(xué)檢測方法的建立及優(yōu)化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 128 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 姜金慶,李廣領(lǐng),王自良,*,劉興友,楊雪峰,黃華國
關(guān)鍵詞: 諾氟沙星|氟喹諾酮|間接競爭ELISA|多殘留檢測
摘要:

采用優(yōu)化的碳二亞胺法制備諾氟沙星(NOR)人工抗原,免疫新西蘭大白兔制備多克隆抗體,建立間接競爭ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線。對NOR的線性檢測范圍為0.07~31.8ng/mL,半數(shù)抑制質(zhì)量濃度(IC50)和最低檢測限(LOD)分別為1.5ng/mL和0.04ng/mL。檢測緩沖液中pH值和磷酸根離子濃度的最佳參數(shù)分別為7.4和10mmol/L;對甲醇和NaOH溶液(30mmol/L)的最佳調(diào)整體積分?jǐn)?shù)分別為30%和10%。抗體具有廣譜特異性,與環(huán)丙沙星(83.3%)、培氟沙星(78.9%)、依諾沙星(68.2%)、恩諾沙星(51.7%)和洛美沙星(41.7%)有較高的交叉反應(yīng)率,可用于氟喹諾酮類藥物(FQs)多殘留檢測方法研究。

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