目的:研究經(jīng)酶解-微波輔助萃取、超濾分級(jí)純化的灰樹花子實(shí)體多糖的免疫活性。方法:采用復(fù)合酶解結(jié)合微波輔助萃取方法提取灰樹花子實(shí)體多糖,采用超濾工藝對(duì)提取多糖進(jìn)行分級(jí)純化;采用MTT法研究多糖對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞、ConA/LPS誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖作用;建立荷瘤小鼠模型,研究灰樹花多糖對(duì)腫瘤的抑制作用。結(jié)果:獲得分子質(zhì)量范圍為<50kD的GFP-I、50~100kD的GFP-II和100~200kD的GFP-III;與RPMI-1640對(duì)照組相比,GFP-I、GFP-II和GFP-III對(duì)淋巴細(xì)胞增殖率分別增加26.558%~74.167%(P<0.001)、20.175%~152.075%(P<0.001)和26.473%~334.797%(P<0.001);對(duì)ConA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖率分別增加31.408%~122.894%(P<0.001)、53.075%~235.693%(P<0.001)和83.347%~367.241%(P<0.001);對(duì)LPS誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖率分別增加20.526%~97.075%(P<0.001)、38.288%~211.348%(P<0.001)和54.454%~344.883%(P<0.001);相對(duì)于生理鹽水(NS)組,在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi),GFP-I、GFP-II和GFP-III對(duì)S180腫瘤的抑制率分別達(dá)到10.15%~22.94%(P<0.001)、12.79%~30.10%(P<0.001),23.86%~51.65%(P<0.001)。結(jié)論:經(jīng)復(fù)合酶-微波輔助萃取、超濾分級(jí)純化后多糖具有顯著免疫活性和抗腫瘤活性,其中GFP-III具有比GFP-I和GFP-II更強(qiáng)的免疫活性和抗腫瘤活性,而且活性與其濃度正相關(guān),多糖可能以對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用為主。
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