利用基因重組技術(shù)克隆黑曲霉(Aspergillus niger)的1 887 bp α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,在畢赤酵母SMD1168中誘導(dǎo)表達(dá)獲得α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶。結(jié)果表明,重組蛋白大小為85 kDa,純化后其比活力為55.73 U/mg;最適反應(yīng)溫度和pH值分別為65 ℃和5.0;金屬離子K+對(duì)該酶活力有促進(jìn)作用,而Cu2+對(duì)酶活力有明顯抑制作用;以4-硝基苯酚-α-L-阿拉伯呋喃糖苷為底物時(shí)測(cè)得Km值和Vmax值分別為2.31 mmol/L和625 μmol/(mL·min);該酶對(duì)柑橘果汁具有顯著澄清效果。本研究不僅豐富了α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶資源庫(kù),同時(shí)為后續(xù)探究α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶在果汁加工中的應(yīng)用提供了參考。
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