通過(guò)對(duì)重組微小毛霉凝乳酶(recombinant Mucor pusillus rennet,RMPR)發(fā)酵條件的研究,確定甲醇誘導(dǎo)體積分?jǐn)?shù)1%、初始OD600nm 0.5、裝瓶量100mL/500mL 搖瓶、誘導(dǎo)時(shí)間96h 為發(fā)酵最適條件。培養(yǎng)液離心取上清用硫酸銨分級(jí)沉淀獲得粗酶液,并對(duì)其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究,經(jīng)測(cè)定該酶的最適反應(yīng)溫度為60℃,30~45℃酶較穩(wěn)定,保溫90min,剩余凝乳酶活力達(dá)86.5%;酶在pH5.5~7.0 范圍內(nèi),隨pH 值升高,凝乳酶活力逐漸降低,pH5.5時(shí)凝乳酶活力最高。當(dāng)Ca2+ 濃度為0.03mol/L 時(shí)凝乳酶活力最高,Na+ 濃度對(duì)凝乳酶活力沒(méi)有明顯影響,Ni2+ 和Fe2+對(duì)酶有抑制作用,Mn2+、K+、Mg2+ 對(duì)酶有一定的促進(jìn)作用。
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