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赭曲霉毒素A模擬表位pⅧ噬菌體表達(dá)載體的構(gòu)建
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 134 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 徐 玲,裘雪梅,劉仁榮*
關(guān)鍵詞: 赭曲霉毒素A|噬菌體展示|pⅧ|模擬表位
摘要:

目的:構(gòu)建赭曲霉毒素A 模擬表位p Ⅷ噬菌體表達(dá)載體。方法:從p Ⅲ噬菌體隨機肽庫篩選到的多個赭曲霉毒素A 模擬表位中取親和力最高的模擬表位,通過化學(xué)方法合成兩條包含該模擬表位及核酸內(nèi)切酶位點的核苷酸序列,退火成雙鏈后與經(jīng)過相應(yīng)酶切的pC89S4 噬菌體質(zhì)粒相連,即插入該載體p Ⅷ前導(dǎo)肽和成熟氨基酸之間,轉(zhuǎn)化進(jìn)XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞中,經(jīng)Xba Ⅰ、EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ三種酶分別酶切初步篩選,測序鑒定。結(jié)果:質(zhì)粒測序與合成的序列一致。結(jié)論:即得到高密度赭曲霉毒素A 的模擬表位噬菌體展示載體。

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