八氫番茄紅素脫氫酶(Pds)是番茄紅素合成的關(guān)鍵酶,本研究通過PCR 法獲取pds 基因和E8 啟動(dòng)子序列,將目的基因和E8 啟動(dòng)子序列構(gòu)建到植物表達(dá)載體pMD1 中,構(gòu)建了含果實(shí)特異表達(dá)啟動(dòng)子的pds 基因的植物表達(dá)載體。并采用PCR、限制性內(nèi)切酶酶切和序列測定分析法,對重組質(zhì)粒進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明:番茄果實(shí)特異性表達(dá)pds 的重組質(zhì)粒構(gòu)建成功;通過農(nóng)桿菌直接轉(zhuǎn)化技術(shù)將其成功轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404、EHA105 中,為下一步pds 在番茄果實(shí)中特異表達(dá)奠定了基礎(chǔ)。
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