本實(shí)驗(yàn)采用皂化法提取蘋果籽油中甾醇化合物,并采用薄層色譜法- 磷硫鐵分光光度比色法對(duì)其進(jìn)行定量分析。研究了最佳提取工藝、展開劑的組成及顯色反應(yīng)的條件,并探討了該方法的精密度、穩(wěn)定性及回收率等。甾醇的最佳提取工藝條件為:料液比1:4、KOH- 乙醇濃度0.5mol/L、皂化時(shí)間120min、皂化溫度85℃;薄層層析最適宜的展開劑為乙醚:石油醚(3:7,V/V),顯色劑為0.02% 羅丹明6B- 乙醇溶液,經(jīng)過薄層分離后在紫外燈照射下呈現(xiàn)紫色譜帶,與磷硫鐵顯色劑反應(yīng)能生成穩(wěn)定的紫色物質(zhì),在波長660nm 處具有最大吸收值。分光光度法測定的最佳顯色條件為乙醇用量2ml,磷硫鐵顯色劑2ml,50℃反應(yīng)15min,該方法具有快速、精密度高,重現(xiàn)性和回收率好,且操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。
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