為探究牛肉在0?℃冷藏下微生物菌群變化和優(yōu)勢腐敗菌,采用培養(yǎng)依賴的16S rRNA結(jié)合高通量測序技術(shù)分析牛肉樣品的微生物多樣性變化。通過定期測定接種牛肉汁的生長、感官、蛋白酶活性、pH值和揮發(fā)性鹽基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)值,分析分離株的致腐特征。結(jié)果表明,牛肉冷藏中感官品質(zhì)保持良好,15?d出現(xiàn)異味,18?d有腐臭味。而樣品中菌落總數(shù)第3天快速上升,15?d菌落總數(shù)為8.73(lg(CFU/g)),之后呈現(xiàn)穩(wěn)定,假單胞菌(Pseudomonas spp.)、熱死環(huán)絲菌(Brochothrix thermosphacta)、腸桿菌(Enterobacter)和乳酸菌4 種分離培養(yǎng)基中細(xì)菌與菌落總數(shù)增長趨勢相似,其中假單胞菌增長最快,腸桿菌數(shù)和乳酸菌數(shù)生長最慢。兩種菌群鑒定結(jié)果顯示,冷鮮牛肉初始微生物構(gòu)成復(fù)雜,包括熱死環(huán)絲菌、不動桿菌屬(Acinetobacter spp.)、氣單胞菌屬(Aeromonas spp.)和假單胞菌等多種菌屬構(gòu)成,而腐敗末期菌群構(gòu)成趨于單一,假單胞菌和熱死環(huán)絲菌為優(yōu)勢腐敗菌,特別是莓實(shí)假單胞菌(P. fragi)。將腐敗分離株10?株假單胞菌、4?株熱死環(huán)絲菌和1?株蜂房哈夫尼菌(Hafnia alve)接種于冷藏的牛肉汁,發(fā)現(xiàn)假單胞菌和蜂房哈夫尼菌的接種組感官評分、pH值和TVB-N值高于熱死環(huán)絲菌,且假單胞菌有較強(qiáng)的蛋白酶活性。研究表明,結(jié)合感官和微生物評價冷鮮牛肉貯藏期為15?d,且菌群多樣性下降,假單胞菌和熱死環(huán)絲菌是優(yōu)勢腐敗菌,其中假單胞菌致腐性較強(qiáng)。
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