領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
建立一種同時(shí)快速檢測(cè)驢、馬、豬及鴨源性成分的四重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time polymerase chain reaction，real-time PCR）方法。分別以4 種源性成分的Nad5、ATpase6、ATP8、cytb基因?yàn)榘谢蛟O(shè)計(jì)特異性引物和TaqMan探針，以18S rRNA基因?yàn)閮?nèi)參基因，建立多重real-time PCR方法，并對(duì)該方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，同時(shí)對(duì)不同摻入比例模擬樣品、不同加工工藝模擬樣品和實(shí)際驢肉樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，該方法具有高通量、特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)Ct值≤35.0時(shí)，方法對(duì)16 種非目標(biāo)源性具有良好特異性；靈敏度可檢測(cè)到質(zhì)量濃度為2×10－4 ng/μL的模板DNA；對(duì)生肉的檢出限為肉含量的0.001%，對(duì)熟肉制品的檢出限為肉含量的0.01%；對(duì)100 份實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法一致，說(shuō)明建立的多重real-time PCR法可用于肉及肉制品中常見(jiàn)摻假源性成分的檢測(cè)。
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