為探索納米抗體在小分子有害物膠體金免疫層析方法(colloidal gold immuno-chromatography assay,GICA)應(yīng)用的可行性,以農(nóng)藥腐霉利為模型,系統(tǒng)研究膠體金標記參數(shù)、膠體金工作緩沖液以及樣品前處理方法等對GICA的影響。結(jié)果表明:膠體金顆粒大小、標記pH值及抗體用量是保證納米抗體-金標探針穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素。在最佳工作條件下,納米抗體GICA檢測腐霉利的檢出限、半抑制濃度和可視檢出限分別為0.44、6.29 μg/L和200 μg/L,其靈敏度比基于傳統(tǒng)單克隆抗體的GICA提高了4.1 倍。采用QuEChERS對韭菜、黃瓜、番茄等樣品進行前處理,利用納米抗體優(yōu)良的有機溶劑耐受性,省去了有機溶劑吹干程序,加標樣品平均回收率介于80.1%~109.6%之間,且對實際樣品的檢測與標準氣相色譜-質(zhì)譜法結(jié)果一致。本研究表明納米抗體作為一種新型原料可替代傳統(tǒng)抗體用于小分子有害物的快速檢測,所建立的腐霉利GICA方法具有靈敏、準確、快速和簡便等優(yōu)勢,可用于蔬菜腐霉利殘留的快速篩查。
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