通過Sep-Pak C18與石墨化碳柱法、超濾法、透析法和葡萄糖凝膠層析法4 種不同的前處理方法,以離子交換色譜法檢測乳糖的去除率和低聚糖的損失率為評價指標,最終確定葡聚糖凝膠層析法為最優(yōu)前處理方法。然后,采用超高效液相色譜-串聯(lián)Q-Exactive Focus質譜對羊乳中的低聚糖進行分析及結構鑒定,以低聚糖的總離子流圖為評價指標,對液相洗脫條件進行優(yōu)化,最終優(yōu)化條件為:0~20 min,95%~78% A(乙腈);20~35 min,78%~73% A;35~38 min,73~62% A;38~45 min,62%~50% A。結果顯示,采用凝膠層析法前處理樣品測得低聚糖種類顯著高于未去除乳糖的樣品,在最優(yōu)液相色譜分離條件下,羊乳低聚糖中同分異構體得到較好分離,對羊乳中低聚糖的結構解析具有重要參考價值。
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