本研究以魚鰾為原料,采用酶法提取類肝素化合物,采用陰離子交換樹脂吸附、氯化鈉溶液梯度洗脫和醇沉法進行分離純化;并進一步分析其結(jié)構(gòu)特征,分別通過紫外光譜法、高效凝膠色譜分析其純度和分子質(zhì)量,醋酸纖維素薄膜電泳初步鑒定其種類,柱前衍生-高效液相色譜法分析其單糖組成,傅里葉變換紅外光譜分析其官能團結(jié)構(gòu),酶裂解-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定其二糖組成,核磁共振鑒定其一級結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示:魚鰾類肝素的得率為(2.21±0.03) mg/g,純度較高,類肝素含量為(85.79±0.63)%,分子質(zhì)量約為84 000 u;單糖組成為葡萄糖醛酸(glucuronic acid,GlcA)和N-乙酰基半乳糖胺(N-acetylgalactosamine,GalNAc),同時含有少量的艾杜糖醛酸、半乳糖;電泳位移與硫酸軟骨素相似,且具有羧基、乙酰氨基、硫酸基軸向伸縮等特征吸收峰。最終確定魚鰾類肝素主要組成是由重復(fù)的二糖單位[→4GlcUA β1→3GalNAc(4S)β1→]構(gòu)成的硫酸軟骨素A。
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