領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為研究肉源大腸桿菌與假單胞菌混合被膜形成，首先采用微孔板結(jié)晶紫染色法評估肉源分離株生物被膜形成能力，進而探討兩種菌代表菌株組合混合被膜形成過程，分析被膜量、微觀結(jié)構(gòu)和胞外聚合物（extracellular polymeric substances，EPS）組成的動態(tài)變化，并采用實時聚合酶鏈式反應(yīng)絕對定量方法分析相關(guān)成膜基因表達差異。結(jié)果表明，大腸桿菌與假單胞菌被膜形成能力均存在顯著的菌株差異（P＜0.05），其中強成膜能力菌株分別占25.81%和23.08%。不銹鋼片平板計數(shù)結(jié)果顯示2 個菌株組合（大腸桿菌菌株D4-18＋假單胞菌菌株Y2-2 10、大腸桿菌菌株C-13＋假單胞菌菌株Y2-1 1）的混合生物被膜的形成過程不同，并且在不同成膜時間兩種菌的相互作用發(fā)生變化。共聚焦激光掃描顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)微觀結(jié)構(gòu)也發(fā)生類似變化。混合被膜形成時EPS中蛋白質(zhì)和多糖的分泌受到抑制，與兩種單菌被膜的總EPS之和相比，混合成膜72 h和168 h蛋白質(zhì)含量分別減少31%和48%，多糖含量分別減少38%和56%。基于單位菌數(shù)基因表達水平發(fā)現(xiàn)，浮游菌形成生物被膜后相關(guān)成膜基因的表達均顯著上調(diào)（P＜0.05）；與單菌生物被膜相比，混合成膜時大腸桿菌papC和csgA基因表達水平在72 h和168 h極顯著上調(diào)（P＜0.01），而假單胞菌phoR和cbrA基因表達水平在72 h極顯著下調(diào)（P＜0.01）。基于單位面積基因絕對表達量發(fā)現(xiàn)，混合成膜時基因絕對表達量相比于單菌被膜發(fā)生不同程度變化。本研究可為揭示肉源腐敗微生物混合被膜形成規(guī)律提供科學基礎(chǔ)，為肉類生產(chǎn)加工中微生物風險評估及污染控制提供科學依據(jù)。
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