為研究小麥非麩質(zhì)致敏原α-淀粉酶抑制劑的表位定位及消減技術(shù),通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)工具DNAstar、IMED、IEDB對(duì)其線性表位進(jìn)行預(yù)測(cè),綜合分析得出6 條候選表位,利用間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)表位進(jìn)行驗(yàn)證,得到4 條線性表位。利用多酚與致敏原互作消減致敏,采用非共價(jià)方法制得α-淀粉酶抑制劑-表沒(méi)子兒茶素沒(méi)食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)/表沒(méi)食子酸兒茶素復(fù)合物,通過(guò)熒光光譜、圓二色譜、紫外光譜進(jìn)行表征,利用間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)消減效果進(jìn)行研究,結(jié)果表明α-淀粉酶抑制劑與EGCG物質(zhì)的量比為1∶30時(shí),復(fù)合物的IgE結(jié)合水平達(dá)到最低,結(jié)合能力下降22.7%。通過(guò)Autodock軟件進(jìn)行分子對(duì)接模擬,經(jīng)與表位進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)EGCG可與α-淀粉酶抑制劑線性表位及其附近殘基相互作用從而達(dá)到致敏性消減的效果。研究結(jié)果可為小麥非麩質(zhì)致敏原表位定位及低敏互作物的制備提供參考。
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