為提高乳酸乳球菌HB03發(fā)酵合成Nisin的效率,本研究基于乳酸乳球菌發(fā)酵生長(zhǎng)期間存在的氧化脅迫效應(yīng)和胞外氨基酸消長(zhǎng)規(guī)律,分析了肽水解酶系、UMP從頭合成和肽聚糖合成代謝在轉(zhuǎn)錄組水平的表達(dá)差異,確定對(duì)數(shù)中后期Nisin合成限制因素為半胱氨酸(cysteine,Cys)和精氨酸(arginine,Arg)供應(yīng)不足,并通過(guò)氨基酸單因素和碳氮源補(bǔ)加優(yōu)化,確定10 L發(fā)酵罐水平優(yōu)化的補(bǔ)料策略為:11、13.5、17、19.5 h分別加入0.15 mmol/L的Cys,12 h補(bǔ)入蛋白胨(15 g/L),10~24 h補(bǔ)入蔗糖(1.5 g/(L·h)),12~21 h流加Arg(0.25 g/(L·h))。在此條件下Nisin效價(jià)達(dá)到了8 963 IU/mL,比只補(bǔ)加Cys發(fā)酵效價(jià)(6 993 IU/mL)提高了28.2%,研究結(jié)果可為Nisin工業(yè)發(fā)酵提供重要參考。
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