目的:研究藍(lán)莓花色苷提取物對(duì)人脂肪干細(xì)胞增殖、分化和功能的影響,評(píng)估其抗脂肪形成的能力及可能的機(jī)制。方法:原代分離培養(yǎng)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,建立人脂肪細(xì)胞體外分化模型。采用不同質(zhì)量濃度的藍(lán)莓花色苷提取物干預(yù)不同生長(zhǎng)時(shí)期的脂肪細(xì)胞。通過(guò)噻唑藍(lán)法和乳酸脫氫酶測(cè)定,觀察藍(lán)莓花色苷提取物對(duì)脂肪細(xì)胞的增殖抑制作用。采用油紅O染色實(shí)驗(yàn)和AdipoRed實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)分化期脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)積累情況,采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定成熟期脂肪細(xì)胞的葡萄糖吸收情況,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定實(shí)驗(yàn)和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法分析脂肪細(xì)胞因子分泌水平以及脂肪細(xì)胞成脂分化基因和脂肪細(xì)胞因子基因的表達(dá)量。結(jié)果:1)干預(yù)48 h后,藍(lán)莓花色苷提取物可以顯著抑制對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、融合期的脂肪細(xì)胞增殖(P<0.05),且有劑量-效應(yīng)關(guān)系(25~175 μg/mL);對(duì)分化期的脂肪細(xì)胞增殖也有顯著抑制作用(P<0.05);同時(shí)極顯著抑制成熟脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)積累(P<0.01)。2)不論1 μmol/L胰島素是否存在,藍(lán)莓花色苷提取物對(duì)成熟脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取均有顯著的促進(jìn)作用(P<0.05),且能夠顯著上調(diào)脂聯(lián)素的表達(dá)(P<0.05)。3)藍(lán)莓提取物使分化期脂肪細(xì)胞中的過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)表達(dá)下調(diào),但在成熟期脂肪細(xì)胞中表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.05)。藍(lán)莓花色苷提取物可以降低人脂肪干細(xì)胞的增殖,抑制細(xì)胞分化,減少脂質(zhì)堆積。通過(guò)增加葡萄糖攝取以及脂聯(lián)素和PPARγ的表達(dá)來(lái)維持或增強(qiáng)成熟脂肪細(xì)胞的功能。結(jié)論:藍(lán)莓花色苷提取物可能具有抗肥胖的潛能。
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