探究植物乳桿菌HB13-2上清液對(duì)白假絲酵母菌的抑制作用及機(jī)制。首先,通過二倍稀釋法測(cè)定了上清液對(duì)白假絲酵母菌的最小抑菌濃度。繼而,通過熒光增白劑對(duì)細(xì)胞壁染色觀察,結(jié)果表明上清液處理使熒光強(qiáng)度增強(qiáng),細(xì)胞壁出現(xiàn)損傷。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)合熒光顯微鏡觀察,結(jié)果顯示植物乳桿菌HB13-2上清液改變了白假絲酵母菌細(xì)胞膜通透性;利用DiSC3(5)檢測(cè)跨膜電勢(shì),結(jié)果顯示熒光強(qiáng)度增強(qiáng),表明上清液導(dǎo)致跨膜電勢(shì)消散。通過掃描電鏡觀察其微觀結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌HB13-2上清液使菌體發(fā)生形變并伴隨內(nèi)容物的泄漏。采用2’,7’-二氯二氫熒光素二乙酸酯以及羅丹明-123熒光染色檢測(cè)活性氧積累和線粒體膜電位,結(jié)果顯示上清液使細(xì)胞內(nèi)活性氧大量積累,線粒體膜電位升高。綜上,植物乳桿菌HB13-2上清液可通過破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜使細(xì)胞發(fā)生形變,并導(dǎo)致線粒體損傷,從而對(duì)白假絲酵母菌發(fā)揮抑制作用。本研究可為植物乳桿菌HB13-2作為口腔益生菌開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。
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