為從鱉蛋黃酶解物中篩選具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性的肽段,以ACE抑制活性為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用超濾和凝膠過(guò)濾色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化。采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)活性組分進(jìn)行肽段鑒定,借助生物信息學(xué)工具進(jìn)行活性評(píng)估。優(yōu)選預(yù)測(cè)活性較高的肽段進(jìn)行合成和活性驗(yàn)證,并用分子對(duì)接工具分析活性肽與ACE的相互作用。結(jié)果表明,鱉蛋黃菠蘿蛋白酶酶解物的水解度為(17.70±0.34)%,抑制ACE的半抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值為(0.210±0.019)mg/mL。對(duì)酶解產(chǎn)物進(jìn)行分離純化,從活性組分F3中鑒定出36 條肽段,選擇6 條活性評(píng)分較高的肽段進(jìn)行合成,其中肽段YNGIWPRD和ASDILPKK的IC50值分別為(0.019 00±0.000 36)、(0.170 0±0.001 3)mg/mL。分子對(duì)接結(jié)果表明,二者均通過(guò)多條氫鍵與ACE緊密結(jié)合。綜上,從鱉蛋黃中篩選出2 條新的ACE抑制活性肽。
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