目的:明確酪蛋白源肽TPTLN的助睡眠作用并探究其可能的作用機制。方法:將30 只小鼠平均分成3 組,實驗組灌胃酪蛋白源肽TPTLN(劑量為5 mg/kg mb),陽性組腹腔注射地西泮(劑量為1 mg/kg mb),對照組灌胃滅菌水(劑量為5 mg/kg mb),所有實驗小鼠每日稱質(zhì)量,連續(xù)給藥7 d后進行戊巴比妥鈉誘導睡眠行為學實驗,評估睡眠質(zhì)量,再繼續(xù)給藥4 d后進行解剖取樣;通過酶聯(lián)免疫吸附試驗測定小鼠血清和腦組織中5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、5-羥基吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、谷氨酸(glutamate,Glu)、β-內(nèi)啡肽(β-endorphin,β-EP)、皮質(zhì)醇、去甲腎上腺素(noradrenaline,NE)的質(zhì)量濃度以及對GABA/Glu值進行評估;實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)分析TPTLN對下丘腦中γ-氨基丁酸A型受體α1亞單位(γ-aminobutyric acid A receptor α1,GABAA-α1)和5-羥色胺受體1A(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HT1A)mRNA相對表達水平的影響。結(jié)果:相比于對照組,TPTLN在戊巴比妥鈉的協(xié)同下可以提高小鼠的入睡率至100%,睡眠潛伏期顯著縮短31.7%(P<0.05),睡眠時長延長1.1 倍(P<0.05);血清和腦組織中GABA/Glu的比值分別提高了68.8%和19.3%,明顯改善了GABA/Glu抑制/興奮代謝失衡(P<0.001,P<0.000 1),血清中GABA的質(zhì)量濃度高度顯著提高了49.4%(P<0.001),腦組織中5-HT的水平上升了7.6%,腦組織中皮質(zhì)醇、NE的含量分別顯著降低了24.3%和23.4%(P<0.05);顯著上調(diào)了GABAA-α1和5-HT1A基因表達水平(P<0.01、P<0.05),分別是對照組的1.5 倍和1.3 倍。結(jié)論:酪蛋白源肽TPTLN具有良好的助睡眠作用,其機制可能與調(diào)控GABAA-α1、5-HT1A的水平及腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)GABA、Glu、5-HT、皮質(zhì)醇、NE的含量有關(guān)。
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