以毛竹筍篼的乙醇提取物為原料,采用凝膠層析技術(shù)從中分離純化出夏佛塔苷黃酮化合物,并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,利用酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)、紫外光譜、熒光光譜、分子對(duì)接等多光譜分析該物質(zhì)對(duì)胰脂肪酶的抑制作用及機(jī)理。結(jié)果表明,一定質(zhì)量濃度的夏佛塔苷對(duì)胰脂肪酶具有顯著的抑制作用(半抑制濃度為(76.3±0.12)μg/mL),為可逆競(jìng)爭(zhēng)性抑制類型;熒光光譜結(jié)果顯示夏佛塔苷以靜態(tài)猝滅方式猝滅胰脂肪酶的內(nèi)源熒光,兩者結(jié)合常數(shù)Ka為1.13×104 L/mol(293 K),結(jié)合位點(diǎn)數(shù)約為1;熱力學(xué)參數(shù)表明夏佛塔苷主要通過(guò)氫鍵和范德華力與胰脂肪酶自發(fā)地形成復(fù)合物;同步和三維熒光光譜分析發(fā)現(xiàn),夏佛塔苷使胰脂肪酶中Tyr和Trp殘基的熒光發(fā)射波長(zhǎng)紅移,猝滅強(qiáng)度下降,導(dǎo)致微環(huán)境極性增大,疏水性減弱,親水性增強(qiáng);分子對(duì)接結(jié)果進(jìn)一步揭示夏佛塔苷分子C環(huán)4位酮基可與胰脂肪酶的催化活性位點(diǎn)HIS264等結(jié)合,作用力包括氫鍵、疏水力、范德華力等。綜上,毛竹筍篼提取物中的主要成分夏佛塔苷具有較好的胰脂肪酶抑制效果,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為利用毛竹筍篼開發(fā)降脂功能食品提供了理論依據(jù)
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