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—— 中國食品雜志社
胞外多糖（exopolysaccharides，EPS）合成基因簇是揭示乳酸菌EPS構(gòu)效關(guān)系的基礎(chǔ)。本研究前期發(fā)現(xiàn)一株高產(chǎn)EPS的植物乳植桿菌Lactiplantibacillus plantarum YZH81菌株含有可能的2 個EPS合成基因簇cps1和cps2，構(gòu)建的YZH81?cps1菌株EPS產(chǎn)量下降。本研究首先利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除了YZH81菌株cps2基因簇。與YZH81相比，YZH81?cps1和YZH81?cps2的EPS產(chǎn)量分別下降了22.88%和35.42%，化學組成改變也較大，突變株均未檢出鼠李糖單糖組分，而甘露糖和葡萄糖占比大幅提高。進一步利用蛋白質(zhì)組學分析了不同發(fā)酵時間（10、32 h）兩個不同cps簇的缺失相比于野生型YZH81菌株的差異蛋白29 個和22 個，京都基因與基因組百科全書和基因本體分析結(jié)果顯示差異蛋白參與YZH81菌株的生物學過程、細胞組成的代謝與加工過程，但敲除cps2簇引起的差異蛋白功能更為豐富，包括脂質(zhì)代謝、核苷酸代謝和肽聚糖的生物合成與代謝等。綜上，本研究明確了YZH81菌株具有兩個獨立的不同cps簇，并分別承擔了不同功能，為后期開展YZH81菌株的EPS益生功能構(gòu)效關(guān)系的研究提供了理論支撐。
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