
分別基于SYBR Green實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)和TaqMan real-time PCR技術(shù)檢測特種乳及其熱處理加工產(chǎn)品中摻假的牛乳成分,同時探討不同熱處理方式對摻假檢測的影響,以滿足不同商品化特種乳制品的檢測要求。結(jié)果表明,所設(shè)計的牛特異性引物可以擴增牛乳中的DNA,與非目標(biāo)動物無交叉反應(yīng)性,具有較高的特異性。兩種real-time PCR方法對于牛乳DNA的檢測限分別為1 pg(SYBR Green)和10 pg(TaqMan),且均可以最低檢測出特種乳混合物中0.1%(m/m)牛乳成分摻偽。為評估摻假模擬的重現(xiàn)性,在3 d內(nèi)共進行了9 次重復(fù)實驗,驗證了方法具有較高的重復(fù)性。同時,為檢測本研究中所建立實驗方法的可用性,對20 種商業(yè)加工特種乳制品進行了真實性分析,其中在7 種產(chǎn)品中檢測出牛乳成分,顯示出所建立的檢測方法具有較高的分辨率和實際應(yīng)用價值。
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