為開發(fā)用于治療2型糖尿病的天然植物降血糖成分,本實(shí)驗(yàn)以藥食同源植物青錢柳葉中的黃酮類化合物為研究對(duì)象,通過乙醇回流提取與聚酰胺柱純化,得到棕黃色黃酮類化合物提取物。利用超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定出其中包含的17 種黃酮類化合物,從中選擇3 種化合物標(biāo)準(zhǔn)品與青錢柳葉黃酮提取物(flavonoid extract of Cyclocarya paliurus leaves,F(xiàn)EC)分析其改善胰島素抵抗活性。借助HepG2細(xì)胞建立胰島素抵抗模型,通過優(yōu)化得出最佳建模條件為葡萄糖質(zhì)量濃度4.5 g/L、胰島素濃度0.001 μmol/L、地塞米松濃度3.5 μmol/L,聯(lián)合誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞24 h,建立的胰島素抵抗模型能穩(wěn)定存在48 h,并且能夠被臨床降血糖藥物二甲雙胍治療。基于胰島素抵抗模型對(duì)黃酮類化合物進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)EC、金絲桃苷、野黃芩苷在質(zhì)量濃度為10-2 mg/mL時(shí)改善胰島素抵抗活性最高,而山柰酚質(zhì)量濃度為10-4 mg/mL時(shí)活性最高。進(jìn)一步的研究表明,青錢柳葉黃酮類化合物可能是通過改善胰島素抵抗模型的糖原代謝紊亂和提高氧化應(yīng)激能力,從而起到改善胰島素抵抗作用。
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