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溶藻弧菌褐藻膠裂解酶的高效表達及其在古羅糖醛酸寡糖制備中的應用
來源:導入 閱讀量: 45 發(fā)表時間: 2025-08-25
作者: 王月,江君,江正強,閆巧娟,楊紹青
關鍵詞: 褐藻膠裂解酶;高密度發(fā)酵;適冷性;鹽激活性;古羅糖醛酸寡糖?
摘要:

本研究發(fā)掘得到1 種溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)來源的新型褐藻膠裂解酶基因VaAly7,并將其導入畢赤酵母中進行高效表達,其酶活力最高達到413 U/mL。通過QSFF強陰離子交換層析柱純化后得到電泳級純酶,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析表明其分子質量約為44 kDa。該酶的最適溫度和最適pH值分別為30 ℃和7.0,為適冷性褐藻膠裂解酶。該酶顯示出鹽激活特性,在400 mmol/L NaCl條件下酶活力約可提高至對照組的8 倍。VaAly7是雙功能酶,對聚古羅糖醛酸具有偏好性,可降解最短鏈底物為古羅糖醛酸五糖。利用VaAly7降解質量分數(shù)為10%的聚古羅糖醛酸,降解產(chǎn)物得率為86%,產(chǎn)物聚合度為1~5,平均分子質量為2.1 kDa。該酶在制備古羅糖醛酸寡糖方面具有應用潛力。

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