為了提高脂肪酶A(Amano lipase A,ANL)的穩(wěn)定性及其赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)降解效率,本實(shí)驗(yàn)以Zn-金屬有機(jī)骨架(Zn-metal-organic framework,Zn-MOF)為載體,通過一步原位固定法合成ANL@Zn-MOF。以O(shè)TA降解率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)確定最佳固定化條件為酶添加量8 mg、固定化時(shí)間2 h、攪拌速率400 r/min。通過X射線衍射、傅里葉變換紅外光譜、熱重分析和掃描電鏡觀察等手段對(duì)ANL@Zn-MOF進(jìn)行表征,結(jié)果表明ANL成功負(fù)載于Zn-MOF,且ANL@Zn-MOF耐堿性、熱穩(wěn)定性和離子強(qiáng)度穩(wěn)定性均優(yōu)于游離ANL。降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ANL@Zn-MOF對(duì)OTA的降解速度更快,ANL@Zn-MOF(其中ANL質(zhì)量濃度為20 ng/mL)能在8 h內(nèi)完全降解OTA,該時(shí)間比游離ANL完全降解OTA的時(shí)間縮短了66.7%;同時(shí)在放大至500 mL的反應(yīng)體系下ANL@Zn-MOF能在12 h內(nèi)降解69.3%的OTA;此外,ANL@Zn-MOF能夠重復(fù)使用,循環(huán)使用5 次后仍能保留78%的相對(duì)活性。本研究可為利用ANL@Zn-MOF降解食品體系中的OTA奠定基礎(chǔ),也可為MOF在酶固定方面的應(yīng)用提供參考。
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