采用表面活性劑介導細胞膜滲透化提高工程菌株甲萘醌-7(menaquinone-7,MK-7)的產(chǎn)量,并探究其作用機制。以工程菌株BS168-ΔSinR作為起始菌株,通過對多種表面活性劑進行篩選和優(yōu)化,進一步提高該菌株的MK-7產(chǎn)量。利用掃描電鏡觀察細胞的形態(tài),流式細胞儀和熒光顯微鏡檢測細胞膜的滲透性,RNA-seq分析影響MK-7產(chǎn)量相關的基因表達水平。結果顯示,添加0.7% Brij-58可顯著提高MK-7產(chǎn)量,使得MK-7總產(chǎn)量較對照菌株提高了71.95%,其中胞外MK-7產(chǎn)量提高了332.29%。掃描電鏡、流式細胞儀和熒光顯微鏡的結果表明,Brij-58介導的膜透化與MK-7產(chǎn)量的提高有顯著關聯(lián)。RNA-seq分析表明,參與MK-7生物合成及抗氧化防御系統(tǒng)相關的基因表達水平普遍上調(diào),而孢子形成相關的基因表達水平均下調(diào)。本研究結果為MK-7的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù),并揭示了表面活性劑介導的膜透化提高MK-7產(chǎn)量的作用機制。
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