研究酶解法制備的青蛤多肽(Cyclina sinensis peptides,CSP)對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。以RAW264.7巨噬細(xì)胞相對(duì)增殖率為指標(biāo),選用胃蛋白酶對(duì)青蛤肉進(jìn)行酶解,酶解液經(jīng)超濾、冷凍干燥后,采用噻唑藍(lán)(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法篩選出增殖活性最高的組分進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)作用研究。采用MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、倒置顯微鏡觀察、中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)、硝酸根還原酶法及酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測(cè)定CSP-5對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖、細(xì)胞形態(tài)、吞噬能力、一氧化氮(nitric oxide,NO)分泌能力及細(xì)胞因子白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌能力的影響;同時(shí)還研究了CSP-5對(duì)巨噬細(xì)胞各周期分布的影響。結(jié)果表明,分子質(zhì)量小于3 kDa的CSP-5對(duì)RAW264.7細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖具有明顯的促進(jìn)作用,且主要作用于G0/G1期,對(duì)細(xì)胞吞噬能力、NO分泌能力和細(xì)胞因子分泌能力的提高具有顯著的促進(jìn)效果;形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示經(jīng)CSP-5作用后巨噬細(xì)胞體積變大且長(zhǎng)出較多偽足。由此可知,CSP-5具有激活巨噬細(xì)胞增強(qiáng)機(jī)體免疫力的潛在作用。
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