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大菱鲆腸道中廣譜拮抗活性乳酸菌的篩選及其細菌素鑒定
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 139 發(fā)表時間: 2019-06-11
作者: 馬國涵,馬歡歡,呂欣然,劉佳伊,孫 悅,白鳳翎,勵建榮
關(guān)鍵詞: 大菱鲆腸道;廣譜拮抗性乳酸菌;篩選與鑒定;細菌素
摘要:

應(yīng)用牛津杯法從大菱鲆腸道分離的乳酸菌中篩選出對革蘭氏陽性和陰性細菌均具有抑制作用的菌株LP1-4,經(jīng)生理生化反應(yīng)和16S rRNA鑒定為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。通過溫度、pH值和蛋白酶等因素分析,結(jié)果表明菌株LP1-4無細胞上清液(cell-free supernatant,CFS)中抑菌物質(zhì)具有良好的熱穩(wěn)定性,在pH 2.5~5.0具有抑菌活性,且對蛋白酶敏感,初步判斷為細菌素類抑菌物質(zhì)。菌株LP1-4在最佳培養(yǎng)時間24 h時抑菌活性達到峰值,應(yīng)用乙酸乙酯萃取后抑菌圈直徑達25.42 mm。采用Labscale TFF System超濾分離和Sephadex G-25凝膠層析獲得小于1.0 ku分子質(zhì)量的細菌素。經(jīng)高效液相色譜純化分析,抑菌物質(zhì)在液相分離條件下目標峰的保留時間為5.0 min。采用基質(zhì)輔助激光解吸電離串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜確定細菌素分子質(zhì)量為0.854 ku,其氨基酸排列順序為谷氨酸-天冬酰胺-賴氨酸-脯氨酸-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-賴氨酸(ENKPAAPK)。本研究從大菱鲆腸道篩選具有廣譜抗菌活性的菌株LP1-4,對研發(fā)控制水產(chǎn)品腐敗菌和致病菌的乳酸菌生物防腐保鮮制劑具有潛在的應(yīng)用價值。

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