目的:研究生鮮牛奶中金黃色葡萄球菌分離、莢膜多糖血清型分布、毒力基因攜帶及脈沖場(chǎng)凝膠電泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分型情況。方法:從河南省4?個(gè)地區(qū)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)采集生鮮牛奶樣品按照國(guó)標(biāo)法進(jìn)行分離,擴(kuò)增耐熱核酸酶基因nuc鑒定金黃色葡萄球菌,利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法測(cè)定莢膜多糖血清型和毒力基因攜帶情況,采用PFGE分析菌株間的相關(guān)性和遺傳關(guān)系。結(jié)果:從350?份生鮮牛奶樣品中分離鑒定到80?株金黃色葡萄球菌,分離率為22.86%。莢膜多糖血清型測(cè)定發(fā)現(xiàn),cap5(60%)是流行血清型。從這些陽性菌株中,發(fā)現(xiàn)有62?株(77.5%)攜帶有毒力基因,毒力基因set、hlb、hld、lukED、ebp、clfA和clfB,檢出率分別為40.00%、51.25%、57.50%、60.00%、58.75%、57.50%和58.75%。此外,47?株(58.75%)菌攜帶不少于6?個(gè)毒力基因,流行的毒力基因譜型為set-hla-hlb-hld-lukED-cna-ebp-clfA-clfB。PFGE結(jié)果顯示,獲得72?株菌的PFGE圖譜,按90%的相似性可分為12?個(gè)簇和46?種PFGE型。D簇(3?種PFGE型)、G簇(3?種PFGE型)和J簇(5?種PFGE型)菌株中均檢出一定基因類型的毒力基因,表明河南地區(qū)生鮮牛奶中金黃色葡萄球菌毒力基因廣泛存在于多種PFGE型別中。結(jié)論:生鮮牛奶均有一定程度的金黃色葡萄球菌污染,多數(shù)菌株攜帶毒力基因,且毒力基因的類型較為復(fù)雜,這對(duì)消費(fèi)這些牛奶的人群構(gòu)成潛在的健康威脅。PFGE分型菌株主要以克隆形式進(jìn)行傳播,且克隆型具有多樣性和差異性,故臨床應(yīng)加強(qiáng)生奶及乳品血清型、毒力基因檢測(cè)及分子分型研究。
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