目的:紅米稻中OsPrx3基因預(yù)編碼一個(gè)過氧化物還原酶,探究該基因原核細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物能否增強(qiáng)動(dòng)物抗氧化的功能。方法:分子克隆OsPrx3基因,采用大腸桿菌表達(dá)目的蛋白,對(duì)攝入目的蛋白的模式動(dòng)物-秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans),鑒別運(yùn)動(dòng)能力、體長(zhǎng)、抗氧化應(yīng)激能力、體內(nèi)活性氧與脂肪含量以及與氧化相關(guān)的基因表達(dá)水平等。結(jié)果:借助大腸桿菌細(xì)胞成功表達(dá)紅米稻過氧化物還原酶基因OsPrx3,分離目的蛋白,體外實(shí)驗(yàn)顯示該蛋白具有較高酶活性,5 min內(nèi)1 μg/mL OsPrx3對(duì)H2O2相對(duì)清除率可達(dá)40%以上;與對(duì)照相比,攝入目的蛋白的秀麗隱桿線蟲,運(yùn)動(dòng)能力和體長(zhǎng)雖無明顯變化,但抵抗外部氧化應(yīng)激的能力卻在氧化處理的15 min內(nèi)明顯增強(qiáng),而且體內(nèi)活性氧、細(xì)胞脂肪含量顯著降低;另外,部分調(diào)節(jié)氧化的關(guān)鍵基因表達(dá)明顯上調(diào)。結(jié)論:基因工程策略成功表達(dá)紅米稻過氧化物還原酶OsPrx3基因,其產(chǎn)物OsPrx3體外具有較高抗氧化活性,秀麗隱桿線蟲攝入該蛋白能顯著增強(qiáng)抗氧化能力。
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