目的:為制備人體高效吸收利用的補(bǔ)鈣劑并探究其對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨活性的影響。方法:對(duì)牛骨多肽進(jìn)行鈣螯合處理,以鈣螯合能力為考察指標(biāo),通過(guò)響應(yīng)面方法確定最佳制備條件;利用紅外光譜、X射線衍射和原子吸收等方法探究肽鈣螯合物的結(jié)構(gòu)特性及其穩(wěn)定性;通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探究牛骨肽鈣螯合物對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞增殖、分化和礦化活性的影響。結(jié)果:制備牛骨肽鈣螯合物的最佳條件為肽鈣質(zhì)量比2.97∶1、溫度62.54 ℃、pH 9.06。在該條件下,鈣螯合能力達(dá)到55.65 μg/mg。光譜結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明氨基氮、羥基氧和羧基氧是鈣主要螯合位點(diǎn),二者之間主要通過(guò)配位鍵結(jié)合,且肽螯合鈣后分子質(zhì)量增加;此外,牛骨肽鈣螯合物穩(wěn)定性受溫度影響較小,但對(duì)pH值較敏感。MC3T3-E1細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明肽鈣螯合物具有明顯促M(fèi)C3T3-E1細(xì)胞增殖、分化和礦化活性的作用。結(jié)論:制備的牛骨肽鈣螯合物具有潛在的促M(fèi)C3T3-E1細(xì)胞成骨活性功效。
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