食源性抗氧化肽安全性高,抗氧化能力較好,近年來成為多肽研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)以蛋清源抗 氧化肽WNWAD(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp),及其拆分肽WNW(Trp-Asn-Trp)、WAD(Trp-Ala-Asp)、WN (Trp-Asn)、AD(Ala-Asp)為研究對象,首先采用2’-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)體外抗氧化評價方法,對5 條肽的抗氧化活性進(jìn)行了評價,建立H2O2 誘導(dǎo)的人胚腎細(xì)胞(HEK293)氧化損傷模型,利用HEK293細(xì)胞模型評價5 條肽的抗氧化活性,然后檢測抗氧化 肽WNWAD對細(xì)胞氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量的影響,最后利用酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 檢測了炎癥因子人白細(xì)胞介素-8及人腫瘤壞死因子的含量。結(jié)果表明:活性肽濃度為40 μmol/L時,WNWAD清除 ABTS+?能力最強(qiáng),Trolox抗氧化當(dāng)量(Trolox equivalent antioxidant capacity,TEAC)為(98.411±0.020)μmol TE/L, 其次為WN、WNW、WAD,其TEAC分別為(96.629±0.008)、(94.978±0.003)、(88.807±0.003)μmol TE/L, AD沒有ABTS+?清除能力。在H2O2濃度為400 μmol/L時,細(xì)胞相對存活率為(50.240±0.505)%,有高度顯著性差 異(P<0.001),不同濃度的蛋清源活性肽對H2O2誘導(dǎo)的HEK293細(xì)胞氧化損傷均有保護(hù)作用,且隨著各條肽濃度 升高保護(hù)作用呈增強(qiáng)趨勢,其中WNWAD的保護(hù)作用最強(qiáng),濃度為30 μmol/L時,細(xì)胞存活率已高達(dá)99.12%。并且 WNWAD可明顯降低細(xì)胞中GSSG含量,降低炎癥因子人白細(xì)胞介素-8和人腫瘤壞死因子的含量。以上研究結(jié)果顯 示蛋清源活性肽對降低HEK293細(xì)胞氧化應(yīng)激水平、提高細(xì)胞抗氧化能力、抗炎能力等有重要作用。
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