針對導致黑色素沉淀的酪氨酸酶,制備了特異性卵黃抗體Fab’片段,研究其對酶活力的抑制效果并從動力學角度進行分析。結果表明,胃蛋白酶法制備Fab’片段的最適條件為:pH?4.0、反應比(卵黃抗體-胃蛋白酶)1∶150(mg/U)、反應時間8?h。經(jīng)免疫親和柱純化后可得理化性質(zhì)穩(wěn)定、純度大于95%的Fab’片段;該片段通過非競爭性結合抑制酪氨酸酶活力,IC50為11.16?μmol/L,結合常數(shù)為5.79×105,抑制效果相比完整的卵黃抗體分子大大提高。本研究可為卵黃抗體Fab’片段作為潛在的酶活力抑制劑在食品、化妝品和醫(yī)藥等行業(yè)中應用提供理論參考。
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