為獲得侵襲性抗腫瘤靶向工程菌株EcNA高菌體濃度的培養(yǎng)基配方,在單因素試驗的基礎(chǔ)上,通過Plackett-Burman試驗篩選出對菌體濃度影響最顯著的因素為酵母抽提物、K2HPO4用量,對顯著影響因素進行中心組合試驗響應(yīng)面分析。結(jié)果表明最佳培養(yǎng)基成分為:可溶性淀粉2?g/L、酵母抽提物50.3?g/L、K2HPO4?14.26?g/L、KH2PO4?3?g/L、MgSO4?0.3?g/L、微量元素母液2?mL/L、接種量3%。發(fā)酵后溶液中菌體OD600?nm?達到7.602,菌體生物量達到2.96×109?CFU/mL,比優(yōu)化前提高了78.3%。以凍干保護劑在冷凍干燥過程中對工程菌株的保護效果為研究對象,通過正交試驗得到制成菌粉的最佳保護劑配方為脫脂乳14.25?g/100?mL、蔗糖3?g/100?mL、抗壞血酸鈉3?g/100?mL,優(yōu)化后菌體凍干粉存活率可達86.32%,利于制成延長貯存期的口服菌粉膠囊。
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