建立纖維素載體固定化β-葡萄糖苷酶系統(tǒng),用于黑豆?jié){中大豆異黃酮去糖基化反應(yīng),并對(duì)該催化系統(tǒng)進(jìn)行了可行性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,在40?cm3纖維素顆粒上可結(jié)合超過40?mg?β-葡萄糖苷酶,并且能有效將4-硝基苯-β-D-葡糖苷酸水解成對(duì)硝基苯酚,其反應(yīng)最適溫度為50?℃。經(jīng)動(dòng)力學(xué)測(cè)試后可得其米氏常數(shù)Km值為(1.38±0.20)mmol/L。將該固定化酶系統(tǒng)用于黑豆?jié){中大豆異黃酮去糖基化,通過高效液相色譜檢測(cè)其轉(zhuǎn)化效率,表明該系統(tǒng)可以在30?min內(nèi)利用40?cm3含酶載體將50?mL黑豆?jié){中的異黃酮全部轉(zhuǎn)化為去糖基化形式。該固定化酶催化系統(tǒng)連續(xù)化催化穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明,在經(jīng)過15?次反應(yīng)以及15?d之后,該固定化酶系統(tǒng)仍然可維持其60%的催化活性。
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