目的:結(jié)合膠體金標(biāo)記技術(shù)和免疫層析技術(shù)建立膠體金免疫層析毛細(xì)管檢測技術(shù),用于水產(chǎn)品中恩諾沙星殘留的快速現(xiàn)場檢測。方法:以間接競爭的實(shí)驗(yàn)原理,通過優(yōu)化檢測區(qū)抗原、質(zhì)控區(qū)二抗、金標(biāo)一抗檢測濃度初步建立膠體金免疫層析毛細(xì)管檢測方法,并進(jìn)一步確定其檢測靈敏度、特異性、重復(fù)性等及前處理的優(yōu)化操作。結(jié)果:該方法檢測恩諾沙星的視覺檢測限為5?ng/mL,半定量檢測限為1.29?ng/mL。在大菱鲆、鲅魚、舌鰨、南美白對蝦陰性樣品中的平均添加回收率在78.3%~129%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%。特異性實(shí)驗(yàn)表明,除對環(huán)丙沙星外,對其他相似物的特異性較好;環(huán)丙沙星的視覺檢測限為10?ng/mL,半定量檢測限為4.37?ng/mL,滿足國標(biāo)檢測的限量要求。同時(shí),針對免疫層析毛細(xì)管檢測的前處理方法進(jìn)行初步探究,最終確定采用常溫條件下磺基水楊酸提取的前處理方法。結(jié)論:恩諾沙星膠體金免疫層析毛細(xì)管檢測技術(shù)具有簡單、快速、易操作、重復(fù)性好的優(yōu)勢,為食品藥物殘留檢測領(lǐng)域提供了檢測新方法。同時(shí),選擇新型試劑作為膠體金免疫層析毛細(xì)管檢測技術(shù)的前處理方法,該方法可以為多種快檢技術(shù)的前處理提供理論基礎(chǔ)與技術(shù)支撐。
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