為開發(fā)利用苜蓿葉蛋白資源,以紫花苜蓿葉蛋白為原料,利用堿性蛋白酶酶解制備抗氧化肽。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,以抗氧化活性為指標(biāo),選取酶解時(shí)間、堿性蛋白酶用量、酶解溫度和pH值為考察因素。采用響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化,其最佳酶解條件為酶解時(shí)間240?min、堿性蛋白酶用量4.80%、酶解溫度60?℃、pH?11.60,在此條件下清除率達(dá)到64.25%。用制備色譜純化并收集抗氧化性最強(qiáng)的抗氧化肽組分,表明純化后的抗氧化肽具有更強(qiáng)的抗氧化活性。用高效液相色譜測(cè)定純化后抗氧化肽的氨基酸組成,其組成為天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、酪氨酸(Tyr)、纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)和賴氨酸(Lys)。
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