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苯基乳酸耐受性大腸桿菌的篩選及其高產(chǎn)苯基乳酸特性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 146 發(fā)表時間: 2017-07-24
作者: 徐?艷,郭?倩,朱益波,王立梅,齊?斌
關(guān)鍵詞: 紫外誘變;苯基乳酸;苯基乳酸耐受菌株;大腸桿菌;全細胞轉(zhuǎn)化
摘要:

苯基乳酸(phenyllactic acid,PLA)耐受性菌株的篩選能夠有效降低PLA對生產(chǎn)菌株的抑制作用,有利于PLA產(chǎn)量的提高。通過紫外誘變的方法篩選耐受PLA的菌株,并應(yīng)用于PLA的合成。以Escherichia coli BL21(DE3)作為原始出發(fā)菌株,通過紫外誘變的方法誘變篩選獲得一株耐受PLA突變菌株E. coli Z2016(CCTCC保藏編號M2016332)。以E. coli Z2016為宿主菌,分別構(gòu)建了重組菌株E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E. coli Z2016 pET-28a-ldhL用于D-和L-苯基乳酸的合成。結(jié)果表明:E. coli Z2016在含有1 g/L D-PLA的培養(yǎng)基中能夠正常生長;重組突變菌株E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V和E. coli Z2016 pET-28a-ldhL全細胞合成D-PLA和L-PLA產(chǎn)量分別為6.75、6.97 g/(L·h),較重組出發(fā)菌株分別提高了14.02%和8.95%;分批補加底物反應(yīng)120 min,E. coli Z2016 pET-28a-ldhY52V得到的D-PLA為20.02 g/L,較對照組提高22.17%,轉(zhuǎn)化率為90.07%;E. coli Z2016 pET-28a-ldhL得到的L-PLA產(chǎn)量為20.87 g/L,較對照組提高16.85%,最終轉(zhuǎn)化率為91.24%。篩選耐受性菌株是提高PLA產(chǎn)量的有效途徑。

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