領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
以錯(cuò)配反應(yīng)與正常反應(yīng)之間的ΔCt值為指示，研究不同堿基錯(cuò)配類型、位置與個(gè)數(shù)條件下引物3′端與模板 之間非特異性擴(kuò)增的發(fā)生規(guī)律，并構(gòu)建ΔCt值的二次多項(xiàng)式回歸模型。結(jié)果表明，堿基錯(cuò)配種類、位置、個(gè)數(shù)對(duì)實(shí) 時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，RT-qPCR）的非特異性擴(kuò)增都有顯著 影響，并呈現(xiàn)出較強(qiáng)的規(guī)律性。堿基類型上，研究的各個(gè)位置上異型錯(cuò)配較易發(fā)生非特異性擴(kuò)增，而同型錯(cuò)配則 較難發(fā)生，并且兩種錯(cuò)配類型之間有顯著性差異（P＜0.05）；錯(cuò)配位置上，相同條件下引物3’端第1位堿基錯(cuò)配對(duì) ΔCt值影響最大，錯(cuò)配位置遠(yuǎn)離3’端時(shí)對(duì)ΔCt值的影響逐漸減小，非特異性擴(kuò)增也更容易發(fā)生；錯(cuò)配個(gè)數(shù)上，隨著 錯(cuò)配堿基個(gè)數(shù)的增加對(duì)ΔCt值得影響程度不斷增大，非特異性擴(kuò)增較難發(fā)生。構(gòu)建ΔCt值預(yù)測(cè)模型R2達(dá)到0.837 1， 根據(jù)此模型可以預(yù)測(cè)出不同位置、不同錯(cuò)配類型條件下ΔCt值，從而可以判斷RT-qPCR非特異性擴(kuò)增的發(fā)生的難易 程度。
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