利用96 孔板和紫外顯影相結(jié)合的定向快速篩選方法,從煙臺(tái)渤海灣采集的腐敗魚尸上分離篩選得到1 株高 產(chǎn)煙酸羥基化酶的菌株H9,通過形態(tài)、生理生化特征和16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育分析鑒定為惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida),對(duì)其產(chǎn)酶培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,最適培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為:可溶性淀粉15 g/L、玉米漿15 g/L、煙酸10 g/L、 K2HPO4 1.0 g/L、初始pH 7.0、培養(yǎng)溫度25 ℃、接種量7%、500 mL三角瓶裝液量50 mL。優(yōu)化后煙酸羥基化酶活 力達(dá)到0.37 U/mL,比優(yōu)化前提高了68%,采用靜息細(xì)胞轉(zhuǎn)化生產(chǎn)6-羥基煙酸產(chǎn)率達(dá)到124.77 g/L,具有工業(yè)化生產(chǎn) 6-羥基煙酸的應(yīng)用前景。
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